Solution
解决方案
蛋白纯化与检测
| STEP 1 | 蛋白样本获取 | |||
| 蛋白纯化 | His-标签蛋白纯化 | 镍亲和层析(TED) | HP101(预装柱) HP201(填料) |
耐受10 mM的EDTA和DTT、重复使用20次,载量可达30 mg/ml |
| 镍亲和层析(NTA) | HP102(预装柱) HP202(填料) |
载量大于50 mg/ml,重复使用10次,兼容性强 | ||
| Strep标签融合蛋白纯化 | Strep-tag亲和纯化 | HP105(预装柱) HP205(填料) |
蛋白纯度高,纯化条件温和,化学耐受性强,填料寿命长 | |
| 蛋白提取 | 核质蛋白提取 | 核质蛋白提取试剂盒 | E101 | 核质分离效果好、蛋白产量高、兼容新鲜&冻存样本 |
| 蛋白富集 | 免疫沉淀 | 蛋白A/G免疫磁珠 | PB101 | 特异性好、蛋白结合效率高、目的条带单一,适用于蛋白、抗体富集 |
| IP/CoIP试剂盒 | PB201 | 操作便捷高效、免疫沉淀效率高、实验重复性好 | ||
| STEP 2 | 蛋白定量 | |||
| 蛋白定量 | BCA定量 | 灵敏型蛋白定量试剂 | E112 | 操作简单、高灵敏度、兼容性广、线性相关性好 |
| Bradford定量 | 通用型蛋白浓度定量 | E211 | 检测蛋白的灵敏度高,操作简便、可兼容很高浓度的去垢剂 | |
| STEP 3 | SDS-PAGE电泳 | |||
| 凝胶制备 | 常规快速蛋白胶 | 蛋白胶预混液 | E301-E305 (6%-15%) |
15 min一步快速制胶、彩色上层胶方便上样、无需添加TEMED |
| 梯度蛋白胶 | 梯度蛋白胶预混液 | E306 | 梯度分离10-250 kDa蛋白,制胶速度快、条带均匀、电泳速度快 | |
| 磷酸化蛋白胶 | 磷酸化通用检测试剂 | PA101 | 无需磷酸化抗体,分离效果好、适用范围广,安全性高 | |
| 上样跑胶 | 蛋白Marker | 180 kDa蛋白Marker | MP102 | 三色预染、条带清晰(10条) |
| MP201 | 三色预染、条带分布均匀(11条)、清晰准确、稳定耐洗 | |||
| 250 kDa蛋白Marker | MP202 | 三色预染、条带分布均匀(11条)、清晰准确、稳定耐洗 | ||
| 凝胶染色(选做) | 考染 | 快速考染试剂(免脱色) | E901 | 无需脱色,染色迅速,灵敏度高(ng级) |
| STEP 4 | 转膜-封闭 | |||
| 转膜 | PVDF膜(0.45μm / 0.22μm) | E801/E802 | 蛋白吸附效果好、机械强度高、化学耐受强 | |
| NC膜(0.45μm / 0.22μm) | E803/E804 | 背景干净、操作简便,无需醇类激活 | ||
| STEP 5 | 抗体孵育 | |||
| 一抗孵育 | 标签抗体 | Anti-Flag | RA1003 | 特异性好,结合效率高,适用范围广(WB、IP) |
| Anti-HA | RA1004 | |||
| Anti-Myc | RA1005 | |||
| 磷酸化& 非磷酸化抗体 |
Anti-Akt | RA2101 | 特异性好,结合效率高,适用范围广(WB、IP、IF、IHC) | |
| Anti-phospho-Akt | RA2102 | |||
| Anti-ERK1/2 | RA2201 | |||
| Anti-phospho-ERK1/2 | RA2202 | |||
| 二抗孵育 | 构象二抗(IP/CoIP用) | 空间构象特异性二抗(抗兔) | RA1008 | 解决IP/CoIP轻重链干扰,精准显示目的条带(建议与PB101搭配效果更佳) |
| 空间构象特异性二抗(抗鼠) | RA1009 | |||
| STEP 6 | 蛋白显影 | |||
| 抗体剥离 | 抗体剥离液 | E701 | 剥离效果好、膜损伤极微、操作简单、无刺鼻气味 | |
| 化学发光检测 | 升级高敏型化学发光液 | E422 | 适用于日常蛋白检测,灵敏度为低皮克级,防过曝性能好,兼容胶片曝光和CCD扫描 | |
| 超敏性型化学发光液 | E423 | 适用于表达量较低的蛋白检测,灵敏度为低飞克级,防过曝性能好,兼容胶片曝光和CCD扫描 | ||
| 即用型升级高敏化学发光液 | E432 | 无需预混,适用于日常蛋白检测,灵敏度为低皮克级,防过曝性能好,兼容胶片曝光和CCD扫描 | ||
| 即用型超敏ECL发光液 | E433 | 无需预混,适用于痕量蛋白检测,灵敏度为飞克级,显影灵敏度,防过曝性能好,兼容胶片曝光和CCD扫描 | ||
| 配套耗材 | 手动移液吸头 | PTR00111/02011/10011 | 移液不残留,匹配多种移液器 | |
| 离心管/EP管 | TCF00115/50 | 良好密封不漏液,高耐受离心力 | ||
| 产品信息 | ||
| 蛋白A/G免疫磁珠 | PB101/PB201 | 结合效率高:≥0.5mg/ml 特异型好:目的条带单一,杂带少 适用范围广:适用于IP、CoIP和ChIP |
| 空间构象特异性二抗 | RA1008/ RA1009 |
适用于IP/CoIP实验 特异性好:可有效避免IP/CoIP轻重链干扰 |
| 镍亲和层析填料(TED) | HP201 | 化学耐受性强:耐受10mM的EDTA和DTT 无需剥镍再生:重复使用20次 动态载量高:30mg/ml 兼容性强:原核、哺乳动物和酵母细胞、不同类型(可溶上清和包涵体)样品 |
| 镍亲和层析填料(NTA) | HP202 | 动态载量高:大于50mg/ml 兼容性强:原核、哺乳动物和酵母细胞、不同类型(可溶上清和包涵体)样品 使用寿命长:重复使用10次,可剥镍再生 |
| Strep亲和层析填料 | HP205 | 蛋白纯度高:pM级亲和力,低表达蛋白纯度佳; 纯化条件温和:生物素竞争性洗脱,保证蛋白生物活性; 化学耐受性强:可耐受50 mM DTT、6 M尿素等; 填料寿命长:50 mM NaOH再生5次性能稳定。 |
| 通用型磷酸化检测试剂盒 | PA101 |
分离效果好:可以分离出不同形式的磷酸化蛋白。 适用于Mn2+/Zn2+离子体系; 适用于无抗体可用的磷酸化蛋白检测; 适用于CBB染色、免疫印迹和质谱等多种下游实验。 |
| 核质蛋白提取试剂盒 | E101 | 核质蛋白分离效果好 新鲜/冻存样本均可兼容 蛋白产量高 |
| Bradford蛋白定量试剂盒 | E211 | 检测蛋白的灵敏度高,操作简便 线性关系好 对去垢剂有很强的耐受性,可兼容很高浓度的去垢剂(SDS浓度低于3% ,Triton X-100低于4% ,Tween-20低于3%,NP-40低于3%) 稳定性好,BSA标准蛋白更纯 |
| BCA蛋白定量试剂盒 | E112 | 操作简单 高灵敏度 兼容性广 线性关系高的标准曲线 |
| 一步法快速制胶试剂盒 | E301-E305 | 浓度选择: 6% (60 -220 kDa);8% (40 - 200 kDa);10% (30 -250 kDa);12%(20-250 kDa);15%(6 -220 kDa) 制胶速度快:只需将(AB液)溶液两两混合,加入促凝剂即可凝胶,制胶仅需15 min。 操作简便:彩色上层胶,拥有三种颜色方便上样和浓度识别。 电泳后条带清晰:不同浓度的蛋白胶预混液制胶后,加蛋白Marker电泳,每个浓度下条带均清晰可见。 无需添加TEMED:无需添加有微腥臭味的TEMED,体验感佳 |
| E306 | 分离范围广:实现10 - 250 kDa蛋白梯度分离,条带均匀,结果更清晰。 无需特殊电泳液:匹配传统Tris - Gly电泳缓冲液。 电泳速度快:150 - 200 V 恒压,35 - 50 min完成电泳。 制胶速度快:只需将溶液两两混合,加入促凝剂,实现10 min内快速凝胶。 操作简便:彩色上层胶,方便上样。 |
|
| 180 kDa蛋白Marker | MP102/MP201 | 条带清晰锐利:三色预染; 高稳定性:4℃稳定存放3个月,反复冻融50次 |
| 250 kDa蛋白Marker | MP202 | 条带分布均匀:11条条带,大小分布广,条带方正 稳定性好:耐洗性能和反复冻融稳定性好 兼容性好:兼容各种类型的蛋白胶﹣自制胶、预制胶 胶预混液等(不适合非变性电泳) 交叉反应少:与抗体之间不易产生交叉反应 |
| 考马斯亮蓝快速染色液(免脱色) | E901 | 方便快捷:15 min快速染色,无需脱色处理 灵敏度高:最低可检测5 ng蛋白 背景干净:背景透明不着色 安全无刺激:无甲醇、强酸性物质 适用范围广:蛋白胶、膜、质谱 |
| PVDF膜(0.45 μm ) | E801 |
蛋白吸附效果好(100-200μg/cm2) ≥20 kDa蛋白建议使用0.45 μm (E801) |
| PVDF膜(0.22 μm) | E802 |
蛋白吸附效果好(100-200μg/cm2) ≤20 kDa蛋白建议使用0.22 μm (E802) |
| NC膜(0.45 μm ) | E803 |
背景干净:非特异性结合少 ≥20 kDa蛋白建议使用0.45 μm (E803) |
| NC膜(0.22 μm) | E804 |
背景干净:非特异性结合少 ≤20 kDa蛋白建议使用0.22 μm (E804) |
| 快速抗体剥离液 | E701 | 高效温和:剥离效果好且不影响抗原蛋白,同一张膜可实现多次剥离检测 操作便捷:无需特殊设备、无需重复电泳、封闭 安全性高:无刺激性气味 兼容性广:适用于PVDF膜和NC膜 |
| 升级高敏型化学发光液 | E422 | 高灵敏度:可检测低皮克级的蛋白 防过曝性好:高微克级蛋白过曝时间为15 min 荧光持续时间长:可曝光显影的时间达6 h |
| 超敏性型化学发光液 | E423 | 高灵敏度:检测可低至飞克级的蛋白 防过曝性能强:高微克级蛋白过曝时间为2min 曝光时间短:微克级蛋白曝光时间为几百毫秒 兼容性好:可兼容不同封闭液与二抗稀释比 荧光持续时间长:持续时间长达4h |
| 即用型升级高敏型化学发光液 | E432 | 操作便捷:即用即取,减少污染 高灵敏度:可检测低pg级蛋白 荧光持续时间长:可曝光显影的时间达5h 强稳定性:25℃可放置1个月 |
| 即用型超敏型化学发光液 | E433 | 操作便捷:即用即取,减少污染 高灵敏度:可检测低fg级蛋白 荧光持续时间长:可曝光显影的时间达5 h 强稳定性:25℃可放置2个月 |