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核酸提取步骤做“简”法，快人一步get优质数据
发布时间：
2024-09-12 15:33
Part 1 传统沉淀法RNA提取的发展
早期阶段：异硫氰酸胍-CsCL超速离心法的局限与突破
异硫氰酸胍-CsCL超速离心法，操作繁琐、流程长且对设备要求高，直到1987年出现异硫氰酸胍-有机溶剂法，才避免了对设备的高要求，使提取更快捷、灵活，但该方法不适于高脂肪含量样本，可能RNA会带有多糖和蛋白污染。
发展现状：TRIZOL提取法的普及与挑战
随着对RNA质量要求的提高，经典TRIZOL应运而生，通过氯仿抽提减少杂质，三相分层使RNA分布在上层无色水相。作为提取的元老，TRIZOL性能虽然抗打硬核，但对新手来说操作有一定挑战，RNA上清吸取时，稍有不慎有机相中的DNA和蛋白可能就被“一波带走”，导致RNA污染。
解决方案
上清更好吸取的“FreeZol”试剂Vazyme #R711，对经典的酸性酚提取法进行改良，使样本兼容性大幅提升，并采用独特的胶体体系沉淀杂质，将RNA最大程度保留在上清的同时，去除DNA和蛋白质等杂质，消除了对相分离的需要，再也不用小心翼翼吸取RNA上清，且全程室温离心，免去提前预冷4℃离心机的麻烦，让沉淀法RNA提取操作更加简单、方便快捷。
图1. Vazyme #R711与传统TRIZOL操作流程比对
Part 2柱式法RNA提取技术的引入与发展
柱式法RNA提取技术的发展历史可追溯到20世纪90年代，利用离心柱和特定的吸附介质（如二氧化硅）捕获和纯化RNA。相比TRIZOL法，无需复杂的氯仿分层、异丙醇沉淀和乙醇漂洗，且对杂质和抑制物质去除效果更好，避免了RNA过度干燥不易溶解的问题，更适合高通量研究环境，可实现较大量样本的快速提取，大幅提升RNA提取效率和纯度。
细胞RNA提取的应用与发展
目前广泛使用的柱膜法为双柱法，需多轮过柱或DNase I消化清除杂质和gDNA，再经多次漂洗得到纯净的RNA。对于想要快速拿到实验结果的研究者来说，这一方法可能仍显繁琐。
解决方案
5 min超快速细胞RNA提取专家Vazyme #RC102，试剂盒采用独特离液盐，实现高效裂解的同时提供结合环境，并搭配特殊硅胶膜特异性吸附RNA，一步实现细胞裂解+RNA结合+gDNA去除，从而减少离心次数，且无需额外加醇、裂解液不起泡，轻松转移过柱。避免复杂步骤可能引入的操作失误和杂质污染，获得的RNA产物质量高、纯度好，极大缩短提取流程、简单快速。
图2. Vazyme #RC102与传统双柱法RNA提取试剂盒流程比对
复杂组织RNA快速提取的新方法
除上述柱式RNA提取，TRIZOL和吸附柱结合的提取方法对多种类和高样本投入量的使用场景也不可或缺。同样的，需要小心吸取RNA上清和4℃离心，有着一定的操作技术和设备要求。
解决方案
复杂组织RNA提取“特种兵”Vazyme #RC113，采用高浓度胍盐和强蛋白变性剂保障复杂样本提取效率的同时，利用低盐浓度缓冲液诱导分层来沉淀杂质，使样本兼容性与传统TRIZOL基本一致，无需使用氯仿、操作简单、快速吸取上清，单个样本10 min轻松搞定。
图3. Vazyme #RC113与传统TRIZOL+柱式法操作流程比对
Part 3磁珠法引领自动化与标准化
功能基因组学、疾病机理研究和药物开发的深入探索推动了RNA高通量提取需求与日俱增，通过对磁珠进行表面修饰（如硅羟基或羧基），实现对核酸的高通量、自动化提取，使得操作更加标准化、重复性和效率得到显著提升，相较于传统沉淀法和柱式提取法，在成本基本不增加的同时，避免了繁琐重复的人工提取程序，大大简化提取流程。
解决方案
“解放双手”的细胞组织自动化RNA提取试剂Vazyme #RMA101，采用高盐和蛋白酶K强效裂解样本并变性蛋白，搭配超顺磁磁性粒子纯化技术和提取体系，保证RNA被充分回收的同时去除杂质残留。可灵活搭配全自动核酸提取仪（Vazyme #VNP-32P/96P），仅需分钟级别的操作批量处理样本，即可全程机提，中间无需暂停。可为每年每人节约两个月的实验时间！试剂预分装，单个样本也能使用，你的时间，我来守护。
图4. Vazyme #RMA101与传统双柱法提取试剂盒操作流程比对
表1. Vazyme #RMA101-C2与TRIZOL性能比对结果
诺唯赞始终秉持“客户为先”的理念，从实验结果完整性、操作便捷性、安全性等多个维度出发，依托先进的技术积累，持续为科研工作者提供更加高效便捷的产品。
还有操作更简便的质粒提取：可视化保中和、单柱设计少离心！
图5. Vazyme #DC204与普通无内毒质粒提取操作流程比对
核酸提取产品推荐
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产品名称 |
产品特点 |
货号 |
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双相分层，RNA上清更易吸取 |
R711 |
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极速5 min，RNA结合与gDNA去除一步到位，减少离心次数 |
RC102 |
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复杂样本成功率高，10 min完成单次提取 |
RC113 |
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VAMNE Magnetic Cell/Tissue Total RNA Kit |
解放双手，试剂预封装，无需接触提取试剂 |
RMA101-C2-P3 RMA101-C2-P1 |
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裂解可视化，上清好吸取 |
DC204 |
