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实验安全 | 拒绝成为实验“耗材”，核酸提取“避毒”指南

发布时间：

2024-09-13 15:08

提取实验常见风险点你都了解吗？

又该如何防范应对呢？

TRIZOL法RNA提取

TRIZOL是一种经典的总RNA抽提试剂，具有高样本兼容性。除了作为单一试剂使用，TRIZOL也可搭配自动化和核酸吸附柱，被广泛应用于RNA提取，虽然它不是直接的致癌物质，但主要成分为苯酚，且提取过程需要添加氯仿，因而也具有一定的危险性。

有毒成分	主要作用	危害
氯仿	加速有机相与液相分层，去除核酸溶液中的迹量酚	氯仿易挥发，具有中枢神经系统毒性，对心脏、肝脏和肾脏都有损害，刺激眼睛、呼吸系统和皮肤，被国际癌症研究机构列为2B类致癌物^【1】
苯酚	裂解细胞，使细胞中的蛋白质和核酸物质解聚并得到释放	可通过损伤的皮肤粘膜迅速进入体内导致全身性中毒，出现急性肾功能衰竭、急性肝损伤和心肌损害，属于高毒类物质
异丙醇	沉淀RNA	具有毒性，吸入高浓度蒸气可能导致头晕和呼吸道刺激

诺唯赞无需氯仿的“FreeZol”试剂（Vazyme #R711），采用独特、无毒稀释液DB Buffer代替氯仿进行分层。利用表面活性剂的独有特性，通过DB Buffer将裂解体系中的杂质悬浮粒子聚集沉淀，达到杂质分离效果，操作更加简便，样本覆盖全。

产品名称

适用样本

产品特点

货号

FreeZol Reagent

培养细胞

动物组织

无需氯仿，室温提取

双相分层，RNA上清更易吸取

R711

吸附柱法和磁珠法RNA提取

柱式法和磁珠法RNA提取都是基于载体表面特定官能团（如硅羟基或羧基）的特异吸附能力，通过高盐低pH结合和低盐高pH洗脱来提取RNA。相比TRIZOL法，具有操作简便，产物纯度高的特点，通常，为了保证RNA的完整性会选择性添加β-巯基乙醇或DTT（二硫苏糖醇）。

有毒成分	主要作用	危害
β-巯基乙醇	β-巯基乙醇是一种强还原剂，可以通过还原RNase中的二硫键，抑制RNase活性，防止RNA降解	危害：有强烈刺激性，散发难闻气味，眼睛接触可致严重损害，导致永久性失明，可致皮肤灼伤、对皮肤有致敏性
DTT（二硫苏糖醇）	强效还原剂，可代替β-巯基乙醇，气味和毒性更小	散发难闻气味，对呼吸道黏膜和皮肤有刺激作用

诺唯赞“无毒”系列产品，采用安全裂解和纯化技术，通过加入离液盐和表面活性剂等物质改变蛋白质结构，从而变性蛋白，抑制RNase活性，为高质量RNA提供技术保障。同时避免酚、氯仿等有毒组分，无需额外添加β-巯基乙醇或DTT，减少对科研人员的身体危害，提供更安全高效的实验环境。

产品名称	适用样本	产品特点	货号
Super FastPure Cell RNA Isolation Kit	培养细胞	RNA结合与gDNA去除一步到位，减少离心次数，5 min获得细胞总RNA	RC102
FastPure Cell/Tissue Total RNA Isolation Kit V2	组织/细胞	快速高效，无需添加β-巯基乙醇	RC112
FastPure Universal Plant Total RNA Isolation Kit	简单/多糖多酚植物	快速高效，无需添加β-巯基乙醇	RC411
VAMNE Magnetic Cell/Tissue Total RNA Kit	组织/细胞	试剂预封装，无需接触提取试剂，灵活通量，单个样本也能上机	RMA101-C2-P3

磁珠法提取FFPE样本DNA

福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）技术是目前长期保存病理样本的标准化方法，可有效固定组织结构，保持细胞和组织原有形态，由其制备的样本（FFPE样本）具备长期常温保存，易于运输等特点，但需进行脱蜡处理后才能提取DNA，最常用的脱蜡试剂是二甲苯，容易造成核酸片段化和人体伤害。

有毒成分	主要作用	危害
二甲苯	将样本浸泡在二甲苯溶液中，高温溶解并去除石蜡，暴露组织样品便于后续消化和核酸释放	具有强烈刺激性气味和高度挥发性，对眼及上呼吸道有刺激作用。高浓度时，对中枢系统有麻醉作用，被国际癌症研究机构列为三类致癌物^【2】

诺唯赞磁珠法FFPE样本DNA提取试剂盒，采用了环保无毒的脱蜡剂DS Buffer，其中的有机溶剂可迅速与石蜡结合，作用于石蜡与组织间的化学键，破坏其结晶结构，实现高效融蜡并释放核酸。同时搭配高亲和力磁珠，获得的DNA产物大片段占比多，无下游抑制，还可搭配全自动核酸提取仪（Vazyme #VNP-32P），一次性完成32个样本的提取。