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上新 | 成功率翻倍的qPCR黑科技—紫韵万象,出色登场!
发布时间:
2025-02-17 17:32
表达量高、低GC的基因如何稳定扩增?
低浓度、低纯度、低完整度的RNA还能做qPCR吗?
熔解曲线出现杂峰的引物是不是一定要换引物解决?
如何轻松应对各种复杂的qPCR实验挑战?诺唯赞全新SuprealQ系列旗舰产品【紫韵万象染料法qPCR预混液(Vazyme #Q713)】为您解决烦恼,紫韵轻松示踪,稳扩万象体系!


产品性能
诺唯赞SupRealQ系列产品,通过BioSmart平台,以高扩增性能为标准筛选核心酶,匹配双物种抗体高封闭技术,能够稳定扩增更多复杂模板,以减少体系调整的重复工作量,提高实验效率。
相对低丰度表达基因稳定检出
在实验过程,我们往往有一些较低表达量基因的检测需求,这些基因在qPCR扩增过程会伴随着CT值30以上、熔解曲线峰形不单一、复孔重复性差的现象,不能真实体现基因表达情况,数据也无法使用,需要通过重新设计引物或者更换基因来解决。
Vazyme #Q713通过BioSmart平台定向筛选扩增性能优异的核心酶,以达到对低丰度表达基因的有效扩增,获得基因真实的表达数据,降低了扩增难度,减少了重新更换基因和引物的工作量。
使用Vazyme #Q713对293 cDNA进行不同基因相同反应体系,出现某些基因CT值落后于其他基因的情况(如下图基因1,基因2,基因3所示),将这种情况下的基因定义为相对低丰度表达基因。
其中基因3使用Vazyme #Q713预混液和市售同类型产品Supplier A进行扩增。结果显示,Vazyme #Q713在该类低丰度表达基因中灵敏度优于Supplier A,且能够保证扩增产物的高特异性。



图1. Vazyme #Q713对低表达基因的扩增效果
扩增一定程度的降解样本
当样本由于存放或提取不当发生降解后,直接导致有效扩增模板数量减少,增加扩增难度。实验表明,对一定程度降解的样本,Q713依然能够实现有效扩增。
在凡纳滨对虾胰腺组织提取RNA后进行核酸电泳,电泳图中无清晰条带,提示该样本存在一定降解。将RNA降解样品逆转录为cDNA,cDNA进行连续2倍稀释3个梯度,使用Vazyme #Q713预混液和市售同类型产品Supplier A扩增对虾基因(机型:ABI QuantStudio 3)。结果显示,与Supplier A相比,Vazyme #Q713在降解样本中仍能稳定扩增,同时扩增效率满足MIQE(The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments)认为的90 - 110%可信区间。

图2. Vazyme #Q713对一定程度降解样本的扩增效果
扩增不同GC含量基因
高GC的模板区域扩增DNA模板难解链,以及低GC的模板区域扩增引物退火效率不够都会直接导致扩增效果不理想,Vazyme #Q713通过酶和buffer的配合能够在更大范围的兼容高低GC模板,减少扩增体系调整带来的工作量。
以293 gDNA为模板,使用 Vazyme #Q713预混液和市售同类型产品Supplier A扩增不同GC含量基因4和基因5(机型:ABI QuantStudio 3)。结果显示,Vazyme #Q713灵敏度及特异性均优于Supplier A。

图3. Vazyme #Q713对高低GC序列的扩增效果
难扩体系,无需担忧!Vazyme #Q713针对复杂体系扩增精心打造,实验难题迎刃而解!
SuprealQ系列染料qPCR Mix产品订购信息
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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SupRealQ Purple Universal SYBR qPCR Master Mix (U+) |
500/2500 rxns |
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SupRealQ Ultra Hunter SYBR qPCR Master Mix (U+) |
500/2500 rxns |
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