T4 DNA Polymerase
用于末端平滑化
缺口填充；切除 3´ 突出末端或补平 5´ 突出端，形成平末端
· 缺口填充 (无链置换活性)
· 切除3′突出末端或补平5′ 突出端，形成平末端
在模板及引物存在的条件下，T4 DNA聚合酶催化沿5´→3´方向合成DNA。此酶还具有3´→5´核酸外切酶的活性，该活性比DNA聚合酶I强。与DNA聚合酶I不同，T4 DNA聚合酶不具有5´→3´核酸外切酶活性。
贮存缓冲液
10 mM Tris-HCl pH 7.4, 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% Triton X-100, 50% glycerol
反应缓冲液 (10 × Blue Buffer)
100 mM Tris-HCl pH 7.9, 500 mM NaCl, 100 mM MgCl2, 10 mM DTT
来源
克隆有来自T4噬菌体DNA Polymerase基因的重组E. coli菌株。
单位定义
37℃、30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为1个活性单位 (U)。
|
组分 |
N101-01 2,000 U |
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T4 DNA polymerase (3 U/μl) |
667 μl |
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10 × Blue Buffer |
2 ml |
反应缓冲液
10X Blue Buffer
100 mM Tris-HCl pH 7.9 @ 25°C
500 mM NaCl
100 mM MgCl2
10 mM DTT
-20℃保存。
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Q1:N101与DNA聚合酶I有什么不同？
A1:该酶具有5´→3´ DNA 聚合酶活性和3´→5´核酸外切酶活性，且活性高于DNA聚合酶I。与DNA聚合酶I不同，T4 DNA聚合酶不具有5´→3´核酸外切酶活性，主要用于切除片段化DNA的3’端突出结构。
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