VAHTS AmpSeq Multi-PCR Module V3
超多重扩增；靶向测序；基因功能研究
· 多重性高：可兼容高达7,000重的定制化Panel
· 产出高：不同起始投入量下（1-100 ng），产出均高于A同类产品
· 均一度高：优化的多重扩增试剂，提高了扩增均一度
VAHTS AmpSeq Multi-PCR Module V3是在超多重PCR技术基础上，研发设计的一款扩增试剂，适用于1-100 ng起始的gDNA、FFPE DNA、cfDNA等模板的多重扩增。优化的多重扩增试剂包含扩增所需的酶、dNTP及反应Buffer，减少了实验过程中的移液操作，使结果更加稳定。相比于上一代产品(Vazyme #NA205)，本试剂盒对不同Panel的扩增均一度有了较大提高，对不同模板起始量和定制化Panel均有着良好的扩增表现，并且可兼容高达7,000重的定制化Panel，可帮助研究者和检测人员简便、快速、高质量地完成超多重PCR扩增，产物适用于下游靶向扩增子文库构建等实验。本扩增试剂经过了严格的质量控制和功能验证，较大程度上保证了试剂的稳定性和重复性。
多重扩增文库产出
图1. 不同投入量和Panel条件下的多重扩增文库产出
以293T细胞基因组DNA为模板，Input DNA分别为1 ng、10 ng和100 ng；根据Vazyme #NA210、A公司同类产品说明书进行多重扩增，结果表明不同起始投入量和Panel条件下，多重扩增模块Vazyme #NA215的文库产出均高于A公司同类产品的扩增模块产出。
-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输
1、产量偏低
①重新定量投入模板量，确认模板起始量是否正确。若低于下限1 ng，需提高投入模板量。
②若模板质量较差，可依据说明书适当提高循环数或使用高质量模板。
③请确认每一步体系以及程序是否按照说明书进行，并注意每一步骤中各项操作细节。
2. 产量偏高
①模板投入量是否高于100 ng，若高于，可减少模板投入量。
②多重扩增循环数可依据说明书适当降低。
3. 产物均一度偏低
①模板受损严重或PCR环节扩增不充分。请使用高质量模板或将PCR环节中退火延伸时间延长。
②AT含量高的扩增子较少：加倍退火延伸时间或将退火温度由60℃降低至58℃。
③GC含量高的扩增子较少：在PCR环节的前两个循环中，将退火温度由60℃提升至62℃。
4. 为什么需要分区操作
PCR产物极易产生气溶胶污染，进而导致实验结果不准确、可信度不高等问题。建议将PCR反应体系配制区和PCR反应区进行物理隔离，使用专用的移液器等设备，并定时对各实验区域进行清洁(使用0.5%次氯酸钠或10%漂白剂进行擦拭清理)，以保证实验结果的可信度。
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