NC Membrane
价格
¥ 2000
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货号 :
E803-01/E804-01
-
规格
- (0.45 μm) 30 cm × 3 m
- (0.22 μm) 30 cm × 3 m
*具体价格咨询当地业务员
NC Membrane
硝酸纤维素印迹膜
蛋白吸附性好,背景干净;无需激活,安全便捷

适用于Western blot等蛋白质印迹检测

0.45 μm孔径(E803):NC Membrane (0.45 μm)是一种孔径为0.45 μm的硝酸纤维素印迹膜(Nitrocellulose membrane,简称NC膜),具有亲水性。其均匀的孔隙结构能够结合生物分子,主要用于免疫印迹(Immunoblotting,即Western blot),可以将蛋白质从各种凝胶基质转移到膜上,对于分子量>20 kDa的蛋白质吸附率更高。
0.22 μm孔径(E804):NC Membrane (0.22 μm)是一种孔径为0.22 μm的硝酸纤维素印迹膜(Nitrocellulose membrane,简称NC膜),具有亲水性。其均匀的孔隙结构能够结合生物分子,主要用于免疫印迹(Immunoblotting,即Western blot),可以将蛋白质从各种凝胶基质转移到膜上,对于分子量<20 kDa的蛋白质吸附率更高。
1.蛋白转印效率高:蛋白吸附性好
2.安全便捷:无需醇类激活,快速更安心
3.剥离再生性好:膜可再生,实现一膜多检
4.兼容性广:兼容丽春红染色和考马斯亮蓝染色

1.蛋白转印效率高
0.45 μm孔径(E803)

将293细胞总蛋白样本梯度稀释,进行SDS-PAGE,使用0.45 μm的NC膜#E803和Supplier A膜在300 mA 2 h条件下转印,分别对Akt(60 kDa)和mTOR(289 kDa)蛋白进行Western Blot检测,结果表明,#E803最低检测限度与Supplier A一致,均可检测至ng级总蛋白,且大分子量蛋白mTOR的蛋白吸附性能优于Supplier A。
0.22 μm孔径(E804)

将293细胞总蛋白样本梯度稀释,进行SDS-PAGE,使用0.22 μm的NC膜#E804和Supplier B膜在200 mA 1.5 h条件下转印,分别对Akt (60 kDa)和Cofilin(18 kDa)蛋白进行Western Blot检测,结果表明,#E804最低检测限度与Supplier B一致,均可检测至低μg级总蛋白,且常规分子量蛋白Akt的蛋白吸附性能优于Supplier B。
2.剥离再生性好
0.45 μm孔径(E803)

将293细胞总蛋白样本梯度稀释,进行SDS-PAGE,使用0.45 μm的NC膜#E803和Supplier A膜在300 mA 2 h条件下转印,先对Akt(60 kDa)蛋白进行Western Blot检测,之后使用抗体剥离液进行膜再生,再生后对β-Actin(42 kDa)蛋白进行Western Blot检测,结果表明,#E803和Supplier A剥离再生性基本一致。
0.22 μm孔径(E804)

将293细胞总蛋白样本梯度稀释,进行SDS-PAGE,使用0.22 μm的NC膜#E804和Supplier B膜在200 mA 1.5 h条件下转印,先对Cofilin (18 kDa)蛋白进行Western Blot检测,之后使用抗体剥离液进行膜再生,再生后对GAPDH(37 kDa)蛋白进行Western Blot检测,结果表明,#E804和Supplier B剥离再生性基本一致。
3.兼容性好
0.45 μm孔径(E803)

将293细胞总蛋白样本梯度稀释,进行SDS-PAGE,使用0.45 μm的NC膜#E803和Supplier A膜在300 mA 2 h条件下转印,分别用丽春红染液与考马斯亮蓝染色液进行染色分析,结果表明,#E803与Supplier A均可进行丽春红染色和考马斯亮蓝染色,且染色后条带深浅基本一致。
0.22 μm孔径(E804)

将293细胞总蛋白样本梯度稀释,进行SDS-PAGE,使用0.22 μm的NC膜#E804和Supplier B膜在200 mA 1.5 h条件下转印,分别用丽春红染液与考马斯亮蓝染色液进行染色分析,结果表明,#E804与Supplier B均可进行丽春红染色和考马斯亮蓝染色,且染色后条带深浅基本一致。




15℃ ~ 25℃保存,室温运输。
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Q1:转膜完成后条带消失并未见marker?
A1:①电源插反,建议:排查正负电极;
②转膜顺序或转膜夹子放反,建议:排查转膜顺序;
③NC膜浸泡不完全,确保完全润湿(无异常白点)。
Q2:NC膜操作过程中易破损?
A2:NC膜机械强度低于PVDF膜,易发生破裂,用镊子夹膜时需小心操作。
Q3:转印后marker上有气泡、条件不完整或条带模糊?
A3:①NC由于材质区别于PVDF膜,在将膜与胶贴合时,间隙中的微小气泡不易被观察到,建议将膜贴合后,用转印轮或剥胶铲来回轻刮平,赶净气泡;
②电流过大导致转膜液过热,建议:将转膜液预冷或转膜之前内外槽加冰;
③“三明治”结构太厚,建议:减少滤纸使用张数。
Q4:条带信号弱?或者小条带在膜上,大条带在胶上?
A4:①转印效率低,建议:延长转膜时间或更换新的转膜液;
②出现不均匀转膜,表示膜没有经过充分的浸润平衡,需要延长膜在转膜缓冲液中的平衡时间。
Q5:大条带在膜上,小条带消失?
A5:①转膜电压太高或时间过长,减低电压,减少转膜时间;
②膜的孔径不合适,要根据蛋白大小选择合适孔径的膜(0.2 μm或更小);
③蛋白与膜的结合不强,可以选择结合能力更强的PVDF膜。
Q6:洗涤过程或剥离液作用后变淡?
A6:①建议缩短洗涤时间,如完成一抗孵育后洗涤:5 min × 3次,完成二抗孵育后洗涤:10 min × 3次;
②建议更换防洗脱效果更优的marker,例如MP201>MP102;
③剥离液中高盐离子作用后会使染料脱色,需要剥离时,建议适当增加marker上样量。
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