Vazyme PureScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Low Nucleic-acid Contamination)
诺唯赞 三代病原微生物多重检测逆转录试剂
10 min一管式病原多重检测逆转录专用试剂
产品应用
病原tNGS检测、肿瘤检测（下游接多重扩增试剂）
产品简介
PureScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Low Nucleic-acid Contamination)是适用于病原微生物、肿瘤检测的第三代逆转录试剂盒。本产品采用新一代逆转录酶变体，辅以优化的缓冲体系，可在10 min内快速合成cDNA，且产物无需纯化可直接用于下游实验。试剂盒中的5 × PureScript III SuperMix包含逆转录所需的全部组分，使用时只需加入模板和RNase-free ddH2O即可快速反应。其采用Vazyme PureScript主动控菌技术搭配GMP洁净车间生产，有效降低产品中的背景核酸残留，保证靶标逆转录的"纯净"。
产品优势
10min一管式高效逆转，操作简单，产量高
性能展示
与常规病原多重检测专用逆转录试剂相比，Vazyme #PR311将逆转所需的组分预混至一管，不仅提高实验重复性，也更适配自动化移液工作站。同时，10 min的快速反应流程，真正实现时间更短，产量更高！
图1. 逆转录实验流程比对图
针对PEDV等病毒设计多重检测panel，以10 pg靶标RNA及10 ng人源 DNA为模板（人源DNA作为背景核酸）。逆转录反应均按照各自说明书程序进行，逆转后吸取9.5 μl的cDNA加入多重PCR体系（RNA体系1、体系2），参照两步法构建文库。结果显示，在低靶标投入量下，Vazyme #PR311采用10 min逆转程序，所获得的一轮文库产量与Supplier B 20min程序的产量相当。
图2. 一轮扩增，产量翻倍
将人293T细胞gDNA和混合病原核酸以1000:1质量比混合构建病原模型（混合病原核酸由17种DNA和RNA病原等质量混合而成），逆转录后不纯化，取9.5μl逆转录产物通过两轮PCR构建扩增子文库，比较不同多重扩增试剂的性能。如图3所示，Vazyme #PR311（10 min逆转）在物种检出率、区域扩增率、二聚体比例等关键指标上，性能优于或等于同类试剂。
图3. 病原靶标灵敏度测试
组分&说明
保存条件
-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。
1. PR311相较于PR211、PR111的升级点是什么？
主要升级包括：试剂为单管预混形式，逆转录时间缩短至 10 min
2. 反应时间能否延长或缩短？
延长时间可提高cDNA产量，不建议缩短时间
3. 反应温度能否调整至50℃？
不建议调整，以免影响酶活，降低逆转效率
4. 逆转录后接一轮扩增，产量偏低怎么办？
确认模板质量，若模板质量较差，可适当延长逆转录反应时间
相关产品
