FastPure Bacteria DNA Isolation Mini Kit
价格
¥ 665
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货号 :
DC103-01
-
规格
- 100 rxns
*具体价格咨询当地业务员
FastPure Bacteria DNA Isolation Mini Kit
简单便捷，针对细菌样本提取
细菌DNA提取；产物可用于酶切；PCR；Southern杂交；qPCR；文库构建；二代测序
· 简单快速：30min内即可获得数个细菌样品的基因组DNA。
· 适用范围广：适用于革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌基因组DNA提取。
· 得率高，完整性好：提取的基因组DNA产量高，完整性好。
· 纯度高：提取的DNA纯度高，可直接用于各种下游反应。
1.产量高、完整性好
使用细菌基因组DNA 提取试剂盒（Vazyme #DC103）以及市售其他品牌细菌基因组DNA提取试剂盒（分别来自Supplier T、C、O），提取不同来源的细菌基因组DNA。
起始量：金黄色葡萄球菌（4.0×108 cells），大肠杆菌DH5α（4.5×108 cells），大肠杆菌Fast T1（4.5×108cells），洗脱体积70 μl，DNA上样量2 μl。琼脂糖凝胶浓度为1%。
M：DL 15000 DNA Marker ( Vazyme #MD103 )
2.纯度高
|
|
Vazyme #DC103 |
T公司 |
|
浓度 |
66.96ng/μl |
63.75ng/μl |
|
OD260/280 |
1.802 |
1.830 |
|
OD260/230 |
1.371 |
0.870 |
分别使用Vazyme #DC103与T公司相关产品提取等起始量大肠杆菌DH5α的基因组DNA，通过OneDrop测定基因组DNA 的浓度与纯度。
通过OneDrop对Vazyme #DC103与T公司提取的细菌基因组DNA测定，可以看出Vazyme #DC103的纯度更高。
本试剂盒采用硅胶膜纯化技术，30 min内可从各种来源细菌（革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌）中提取高质量基因组DNA。提取过程中无需使用酚氯仿等有毒试剂，也无需进行耗时的醇类沉淀，并较大限度去除RNA、杂蛋白、脂类及其他抑制性杂质。提取的基因组DNA纯度高，质量稳定，可用于酶切、PCR、Southern杂交等下游实验。
15 ~ 25℃保存，室温运输。
Q1：柱子堵塞
A1：(1) 样品用量过多：减少样品用量，使用量应小于1.0×109个细菌；
(2) 消化液中存在不消化的物质：若样品消化后，溶液中存在明显的颗粒物质，可于12,000 rpm离心3 min去除未消化的物质。
Q2：DNA产量低
A2：(1) 样品使用量过少：根据细菌培养情况来确定细菌用量，有些细菌培养后浓度低，可适当增加细菌用量；
(2) 革兰氏阳性菌破壁不完全：可适量增加Lysozyme的用量或延长酶消化时间；
(3) Proteinase K保存不当导致其活性降低或失活：Proteinase K溶解后应分装置于-20℃保存；
(4) 洗脱液问题：请使用Elution Buffer洗脱，若用ddH2O或其他洗脱液，确认洗脱液pH值在7.0-8.5之间；
(5) 洗脱不充分：洗脱液需加值吸附膜中央位置，增加洗脱体积或增加洗脱次数；
(6) Buffer PB/PW为添加无水乙醇。请参考试剂瓶标签说明加入正确体积的无水乙醇。
Q3：DNA纯度低
A3：(1) 样品裂解不充分：样品与Buffer GB混匀不充分，重新提取并振荡使样品与Buffer GB充分混匀，或样品用量太多，减少样品用量；
(2) 杂蛋白污染、RNA污染：未使用Buffer PB洗涤吸附柱，或用Buffer PB洗涤吸附柱时没有使用正确的离心转速。在上清液过柱时尽量保证上清液中无沉淀；务必按说明书用Buffer PB洗涤吸附柱，并且此步骤不能省略；
(3) 杂质离子污染：省略了Buffer PW洗涤吸附柱或者只洗涤了一次。按说明书使用Buffer PW洗涤两次，尽量去除残留的离子；
(4) 乙醇残留：Buffer PW洗涤吸附柱后，没有进行空管离心操作。请按照说明书进行空管离心操作。
Q4：DNA 溶液带颜色或膜上有色素残留是什么原因造成的
A4：（1）漂洗次数不够：步骤7完成后，加 500 μl 无水乙醇再漂洗一遍；
（2）样品起始量过多：减少样品起始量，避免过量。
Q5：DC103能不能提菌斑
A5：DC103研发端测试过大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，＜1.0×10^9个细菌，
大肠杆菌过夜摇2 ml 约可提取10μg DNA。
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